LeapWal 無血清細胞凍存液 PZ110R含多種保護劑成分,一些保護劑,易于穿透細胞,避免細胞內部水分子形成冰晶損傷細胞,同時另一些保護劑不能穿透細胞,但可以在冰晶形成之前,優先結合細胞外的水分子,降低細胞外溶液的電解質濃度,減少陽離子進入細胞的數量,我公司無血清細胞凍存液,為多種保護劑組合,在細胞內外進行雙重保護,大大提高了細胞復蘇存活率。
LeapWal 無血清細胞凍存液 PZ110R細胞復蘇過程:
(1)提前開啟水浴鍋,溫度調節到37度。輕輕的晃動凍存管,注意管內凍存細胞的融化情況。當管內的冰核還有黃豆大小的時候,取出來,用酒精棉擦拭管體,轉移到超凈工作臺內。
注意:這一步對細胞存活率至關重要。既要盡快融化,以減少融化過程對細胞的損害;又要盡可能減少細胞在較高溫度停留的時間,以減少DMSO對細胞的毒害。切不可將凍存管放在水浴鍋內不管。
(2)將凍存的細胞冷凍管從液氮中取出,迅速置于水浴鍋中融化,盡量1min融化,時間越短,對細胞影響越小。
(3)打開凍存管管蓋。輕柔的將凍存管內的細胞懸液(約1mL)吸取出來,轉移到一個預冷的15mL離心管內。緩慢加入10mL細胞培養基(4℃),邊加邊輕搖混勻,滴加完之后蓋上管蓋,輕輕地上下顛倒混勻。將融化后的含細胞的冷凍保存液迅速析出置于新鮮培養基中充分混勻,(如細胞冷凍保存液為500ul,則加入到5ml新鮮培養基中,如細胞冷凍保存液位1ml,則加入10ml新鮮培養基中。)
(4)混勻后立即離心,800轉,3min即可,離心結束后棄上清,加入預溫的新鮮培養液。
(5)混勻后分瓶置于二氧化碳培養箱中培養。(二氧化碳濃度根據培養基要求決定,通常為5%)。